液體菌種制作是現代微生物培養技術的重要組成部分,廣泛應用于食用菌、藥用菌、工業菌等領域。液體菌種具有生長速度快、純度高、易于接種等優點,大大提高了菌種的培養效率和質量。本文將介紹液體菌種制作的操作過程及液體菌種培養基配方。
一、液體菌種制作操作過程
1. 準備工作:首先需要準備好所需的儀器設備,如無菌操作臺、高壓滅菌器、培養箱、搖床等。還需要準備好培養基原料,如葡萄糖、酵母粉、蛋白胨、硫酸鎂、磷酸二氫鉀等。
2. 培養基配制:按照液體菌種培養基配方,準確稱取各種原料,將其溶解在適量的蒸餾水中,攪拌均勻,使培養基成分充分溶解。然后將培養基溶液倒入無菌容器中,進行高壓滅菌處理。
3. 冷卻與接種:將滅菌后的培養基溶液放置在無菌操作臺上,待其冷卻適宜的溫度(通常為25-30℃),即可進行菌種接種。將預先培養好的固體菌種用無菌接種針挑取少量,迅速接入液體培養基中。
4. 培養與觀察:將接種好的液體菌種放入恒溫搖床中,設置合適的轉速和溫度,進行培養。在培養過程中,要定期觀察菌液的生長情況,如顏色變化、氣泡產生等。還可以通過顯微鏡觀察菌絲的生長狀況,以判斷菌種是否生長良好。
5. 收獲與保存:當液體菌種生長到一定階段,可以對其進行收獲。將菌液通過無菌濾紙或無菌紗布過濾,去除雜質和死細胞,得到純凈的液體菌種。將液體菌種分裝到無菌容器中,密封保存在低溫條件下,以備后續使用。
二、液體菌種培養基配方
液體菌種培養基配方因不同菌種而異,以下是一種通用的液體菌種培養基配方:
1. 葡萄糖:20克
2. 酵母粉:10克
3. 蛋白胨:10克
4. 硫酸鎂:0.5克
5. 磷酸二氫鉀:2克
6. 水:1000毫升
將以上原料按比例混合,加入適量的蒸餾水,攪拌均勻,使培養基成分充分溶解。然后進行高壓滅菌處理,冷卻適宜溫度后進行菌種接種。
液體菌種制作是一項重要的微生物培養技術,通過掌握正確的操作過程和培養基配方,可以為食用菌、藥用菌、工業菌等領域提供高質量的液體菌種。